熒光抗體操作過程為何要避光?
(1)生物化學反應需要酶的催化作用,所以熒光素在熒光素酶和ATP等物質的參與下可進行反應發(fā)出熒光.ATP是生命活動能量的直接來源,發(fā)光強度與ATP的含量成正比,所以根據(jù)發(fā)光強度可以計算出生物組織中ATP的含量。
(2)影響酶活性的外界因素有溫度和pH,其中維持溶液pH的相對穩(wěn)定時常常使用緩沖液.分光光度計反應室內發(fā)生的能量轉換是ATP中活躍的化學能轉化為光能。
(3)熒光素酶濃度不同,但發(fā)光強度相同,由于受ATP數(shù)量限制,發(fā)光強度也不再增加。
(4)每個細菌細胞中ATP的含量大致相同且相對穩(wěn)定,可以根據(jù)樣品中細菌的ATP總含量,測算出細菌的數(shù)量。